Лабораторная диагностика гельминтозов

Диагностика гельминтозов

Лабораторная диагностика гельминтозов

Гельминтозы и протозоозы наносят значительный ущерб здоровью человека. Заболевание может проявляться абдоминальным, аллергическим, анемическим синдромом, хроническим токсикозом, глисты и простейшие могут поражать ткани печени, легких, желчевыводящих путей, головного мозга, глаза.

Гельминтозы не имеют специфических симптомов, поэтому присутствие паразита можно подтвердить только лабораторными и инструментальными методами. Диагностика гельминтозов может включать гельминтоовоскопию, гельминтоларвоскопию, серологические методы, а также рентген, эндоскопию, УЗИ.

Методы диагностики гельминтозов

Исследование на гельминтозы назначается при появлении характерных клинических симптомов и на основании эпидемиологического анамнеза (содержание в доме животных, посещение зараженных мест, возможное употребление зараженного мяса или воды). Лабораторная диагностика гельминтозов может проводиться в течение нескольких часов или дней, что зависит от вида паразита, который предположительно провоцирует возникновение симптомов.

Паразитологические методы могут быть прямыми, то есть заключаются в обнаружении паразита, его фрагмента или личинки, или же применяются иммунологические методы, которые позволяют обнаружить гельминта в личиночной стадии развития, в фазе миграции, при паразитировании только самца, несильной инвазии, а также если у червя угасла или еще не развилась репродуктивная функция.

Исследование испражнений

В диагностике гельминтов большое значение имеет копрологическое исследование, поскольку большинство глистов паразитируют в кишечнике, а их яйца выделяются вместе с калом. Каловые массы исследуют макроскопическим и микроскопическим способом.

С помощью макроскопического метода в фекалиях обнаруживают гельминтов или их части. В чашке Петри или небольшой плоской емкости кал смешивают с водой и рассматривают через лупу. При достаточном количестве света на темном фоне удается обнаружить белые фрагменты глиста. Все подозрительные вкрапления перекладывают на предметное стекло с глицерином для дальнейшего рассмотрения под увеличением.

Для обнаружения части гельминта может использоваться и метод отстаивания. Фекалии смешивают с водой и позволяют отстояться, после этого сливают воду.

После нескольких отстаиваний, когда вода уже будет прозрачной, жидкость выливают, а осадок рассматривают в чашке Петри.

При микроскопии испражнений за яйца глиста могут приниматься пузырьки воздуха, растительные клетки, споры и пыльца растений, частички непереваренной пищи.

В сомнительных случаях необходимо проводить повторные анализы. Методические указания (МУК), разработанные в 2013 году, устанавливают порядок применения метода отбора проб и описывают методы лабораторных исследований биоматериала, что позволяет применять наиболее современные методы для лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов и корректно расшифровывать их результаты.

Микроскопический метод помогает выявить личинки паразитов или их яиц. Наиболее применяемым и доступным считается нативный мазок, который позволяет увидеть яйца и личинки всех глистов. Небольшое количество перемешенного кала наносят на предметное стекло, смазанное глицерином, и рассматривают при небольшом увеличении.

При невыраженной инвазии яйца и личинки не всегда получается обнаружить, поэтому используются методы обогащения.

В методах используется то, что имея различный вес личинки паразитов всплывают на поверхность физиологического раствора или, наоборот, оседают на дно. Если яйца тяжелее жидкости, то они скапливаются в осадке (метод седиментации позволяет выявить яйца трематод), а если легче, то яйца всплывают (метод флотации позволяет увидеть яйца власоглава, карликового цепня, анкилостомид).

Методы седиментации и флотации эффективны, поскольку удается найти даже небольшое количество яиц

Метод Фюллеборга

В стеклянную банку помещают 2–5 г кала и заливают физиологическим раствором (400 грамм соли на литр воды), затем размешивают и дают отстояться. Спустя 45 минут, образовавшуюся пленку помещают на предметное стекло с глицерином. Другой способ поместить пленку на стекло: долить в сосуд воды до краев и накрыть предметным стеклом.

В соленой воде яйца всплывают и их можно увидеть в микроскоп, но у различных гельминтов яйца поднимаются на поверхность жидкости с различной скоростью (карликового цепня спустя четверть часа, аскарид через полтора–два часа, власоглава только через 2–3 часа). Помимо образовавшейся поверхностной пленки, обязательно нужно исследовать и осадок, так как яйца тениид, трематод, аскарид тонут при данной концентрации солевого раствора.

Преимуществами данного метода является его доступность, низкая стоимость и высокая эффективность, поэтому его часто сочетают с нативным мазком. Среди недостатков данного способа диагностики гельминтоза можно выделить необходимость исследования поверхностного слоя и осадка, а также продолжительное время для отстаивания.

Метод Калантарян

Также предполагает использование насыщенного раствора натрия, но только меньшей относительной плотностью (килограмм соли нитрата натрия на литр воды), что приводит к всплытию большинства яиц гельминтов, а значит рассматривать осадок не требуется.

К недостаткам данного метода диагностики гельминтозов относят необходимость использования большого количества соли натрия и азотистой кислоты, кроме того, онкосферы тениид и яйца трематод не поднимаются на поверхность. Если раствор стоит дольше 1–2 часов, то яйца некоторых глистов набухают и уходят в осадок.

Метод Горячева

Предполагает осаждение яиц. В емкость переливают раствор изотонический. В отдельной банке смешивают фекалии с водой, отфильтровывают через марлю, и наливают поверх солевого раствора, так чтобы получилось два слоя. Спустя 2–3 часа, слой с калом убирают при помощи пипетки, а второй слой оставляют еще на 12–20 часов или помещают в центрифугу.

Осадок переливают на предметное стекло и рассматривают в микроскоп. Данный метод был предложен для поиска возбудителя описторхоза и оказался более информативным, чем микроскопия нативного мазка или метод Фюллеборна, однако, он почти не используются, поскольку технически сложен.

Метод Красильникова

ПАВы, которые входят в состав стиральных порошков, освобождают яйца глистов от кала, и тем самым способствуют выпадению их в осадок. Десять грамм моющего средства растворяют в литре воды. Наливают раствор в стеклянную банку, добавляют туда испражнения и перемешивают.

За сутки в растворе образуется осадок из нескольких слоев. На дне оседают крупные частицы, в среднем слое концентрируются яйца гельминтов, вверх всплывают сероватые хлопья. Для исследования берут пипеткой 2–3 капли жидкости из второго слоя.

Метод Красильникова дает возможность диагностировать любой вид гельминтоза, однако, он занимает много времени

Эфир-уксусный метод

Дает возможность выявить даже мелкие яйца трематод, кишечных глистов и цисты простейших, он также применяется, чтобы определить интенсивность инвазии.

Фекалии помещают в емкости с уксусной кислотой и перемешивают до однородности, затем процеживают, переливают во вторую пробирку и доливают эфир. Все взбалтывают и помещают в центрифугу.

Образовавшийся верхний слой снимают, а осадок наносят на предметное стекло и изучают под микроскопом.

Поиск живых личинок

Закручивания по Шульману позволяет обнаружить в каловых массах живых личинок глистов (в частности, стронгилоида). Для анализа берется только свежий кал.

Его опускают в стеклянную банку с физиологическим раствором, и размешивают круговыми движениями, не дотрагиваясь до стенок. Яйца и личинки паразитов концентрируются в центре.

После перемешивания стеклянной палочкой (которой мешали) делают мазки на предметном стекле.

Метод Бермана

Использует то, что личинка двигается по направлению к теплу. С помощью данного диагностического метода можно выявить сгронгилоидоз.

Так, 20–50 грамм фекалий кладут на металлическую сетку и ставят ее в воронку, в которую наливают теплую воду (40–50 ⁰С). Личинки перемещаются из кала в воду. Их оставляют отстаиваться в течение 3–4 часов.

Отстоявшуюся жидкость помещают в центрифугу, а затем исследуют.

Метод Харада и Мори

Данный метод советует ВОЗ для обнаружения анкилостомидоза у людей и проводится при необходимости дифференцировать анкилостомоз от некатороза. В центр фильтрованной бумаги наносят полграмма кала.

Затем бумагу опускают в пробирку таким образом, что чистый конец оказывается в воде, а верхняя часть закрепляется пробкой, при этом фекалии не касаются воды. Пробирку помещают в термостат на 5–6 суток.

За это время филяриевидные личинки оседают и их можно увидеть через лупу.

Проверка перианального соскоба

Данный метод применяется для обнаружения яиц остриц и бычьего цепня. Он предполагает проверку перианального смыва или соскоба. Сбор материала проводится утром до акта дефекации (у девушек и до мочеиспускания) или вечером, спустя 2–3 часа после того, как пациент заснул. У детей образец может быть взят после дневного сна.

Для соскоба может использоваться ватный тампон или палочка, а также клейкая лента. Ватным тампоном проводят в области перианальных складок и возле ануса. Палочку с тампоном опускают в пробирку и отправляют в лабораторию. Лаборант делает мазки на предметных стеклах и микроскопирует их.

Метод перианального соскоба широко распространен, поскольку прост в применении и позволяет собрать материал для исследования в домашних условиях

Метод Грэхема или липкой ленты

Также является эффективным, поскольку позволяет диагностировать аскаридоз и обнаружить онкосферы тениид. Для сбора материала используется прозрачная клейкая лента длиной в 4–5 см. Ее липкой стороной прикасаются к перианальным складкам, быстро снимают и клеят на предметное стекло. Преимущество метода в том, что можно долго хранить образец.

Дополнительные способы

Лабораторная диагностика гельминтозов может включать:

Диагностика аскаридоза

  • исследование содержимого кишечника. Личинки и яйца глистов, заселяющих печень, желчный пузырь, поджелудочную железу и двенадцатиперстную кишку, можно разглядеть в желчи и содержимом кишечника. Образцы для исследования берут во время дуоденального зондирования. С помощью полученных материалов можно диагностировать описторхоз, фасциолез, клонорхоз, дикроцелиоз, анкилостомидозы, стронгилоидозы;
  • исследование мочи. Метод позволяет обнаружить яйца шистосом. Для проведения теста необходимо 50 мл мочи, собранной в середине дня, перелить в конический стакан и дать отстояться полчаса. Затем мочу сливают, а осадок помещают в центрифугу;
  • исследование мокроты. При рассматривании образца мокроты через микроскоп можно увидеть яйца легочного сосальщика (парагонима), личинки аскариды, некатора и стронгилоида, фрагменты эхинококкового пузыря;
  • исследование крови. При окрашивании биоматериала по Романовскому можно выявить личинки нематод, паразитирующих в подкожной клетчатке. Кровь нужно брать и в ночное время, поскольку личинки при некоторых тропических филяриозах заметны, только когда человек отдыхает. Анализ крови на гельминтозы информативен еще и потому что показывает пониженное количество эозинофилов, что косвенно указывает на присутствие в организме червей.

Исследование мочи позволяет обнаружить червя, вызывающего мочеполовой шистосомоз

Серологические методы

Иммунологическое исследование проводится при подозрении на тяжелые тканевые гельминтозы и трематодозы. С помощью ИФА выявляют эхинококкоз, трихинеллез, альвеококкоз, токсокароз, цистицеркоз, описторхоз, фасциолез, клонорхоз. При гельминтозе в крови повышается сначала уровень титра IgM, а затем и титр IgG, что указывает на активное инфицирование.

Дифференциальная диагностика гельминтозов IgG (кач), эффективна не только при обнаружении аскарид, но и для выявления протозоозов (простейших), которые в той же мере способны навредить организму. Метод реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) позволяет обнаружить описторхоз, эхинококкоз, альвеококкоз, трихинеллез.

Эхинококкоз и альвеококкоз также можно обнаружить при использовании реакции латекс-агглютинации (РЛА), а цистицеркоз и трихинеллез подтвердит реакция кольцепреципитации (РПК). Эти методы применяются в том случае, если другими более простыми способами не удается доказать присутствие глиста в организме.

Серологические результаты не означают, что гельминт находится в крови, а лишь указывают, что на него выработались антитела.

Для выявления некоторых гельминтозов у человека, поражающих отдельные органы, проводятся инструментальные исследования:

  • рентген;
  • УЗИ;
  • компьютерная томография;
  • магнитно-резонансная томография;
  • эндоскопия.

Данные методы диагностики могут применяться и для оценки тяжести поражения гельминтами внутренних органов. В редких случаях удается увидеть самих червей, чаще исследование проводится для обнаружения неспецифических признаков заражения (увеличение пораженного органа, нарушение сокращение желчного пузыря, появление кист).

С помощью лабораторной диагностики гельминтозов удается обнаружить самих паразитов их фрагменты, яйца или личинки, что позволяет установить точный диагноз и назначить адекватное лечение

Анализ крови на гельминтозы является менее информативным, поскольку указывает только на развитие иммунного ответа организма, а это значит, что инвазия была, но когда именно не известно.

Как сдавать анализ на определение того или иного вида гельминта, подскажет лечащий врач.

Как правило, специальной подготовки не требуется (венозная кровь сдается натощак, материал для исследования кала берется из трех разный мест и хранится не дольше 8 часов). Если в испражнениях не выявлены глисты, то это не говорит о том, что они отсутствуют в кишечнике и, скорее всего, будут проведены повторные анализы кала.

Источник: https://vrbiz.ru/diagnostika/gelmintozov

Диагностика паразитарных болезней

Лабораторная диагностика гельминтозов

Основой диагностики паразитарных болезней, в частности гельминтозов, являются результаты лабораторных исследований, которые выявляют непосредственно возбудителей, их антигены или антитела к ним.

Гельминтозы развиваются в результате инвазии (заражения) организма окончательного хозяина (человека или животного), используемого как место обитания гельминтов и источника их питания. Часто болезни протекают без выраженных специфических клинических симптомов, что не всегда позволяет поставить диагноз по клинической картине.

Диагностика гельминтозов должна быть комплексной и основываться на данных эпидемиологического анамнеза, клиники заболевания и лабораторных исследований.

Специфика биологии каждого конкретного вида гельминта диктует необходимость различной тактики лабораторных исследований, которая направлена на обнаружение в одних случаях гельминтов или их фрагментов, а в других – их личинок, яиц или специфических иммуноглобулинов.

Материал для исследования берется в зависимости от подозрения на наличие у больного того или иного гельминтоза, так как пути выделения яиц, личинок или фрагментов паразитов из организма человека могут быть разными.

Для геогельминтов характерен кишечный (интестинальный) путь выделения яиц и личинок из организма больного человека.

Большинство гельминтов, яйца которых выводятся через кишечник, паразитируют в пищеводе, желудке, кишечнике, а также попадают в кишечник при миграции через легкие, бронхи, трахеи, гортань, когда происходит заглатывание яиц и личинок со слизью при кашле.

Этот путь присущ трематодам, цестодам и многим нематодам (в частности, геогельминтам). Материалом для исследования служат фекалии (кал). При исследовании проб фекалий обнаруживаются яйца и личинки многих гельминтов.

Паразитологические методы лабораторных исследований применяются:

  • с диагностической целью;
  • для контроля эффективности лечения;
  • для оценки качества проведенного комплекса лечебно-профилактических мероприятий;
  • для установления уровня пораженности населения (при профосмотрах)

Лабораторная диагностика является важным методом при паразитарных заболеваниях. В то же время качество лабораторной диагностики зависит от множества факторов, таких как надлежащая подготовка пациента к лабораторному обследованию, правильный забор материала для исследования и выбор оптимальной методики, квалификация и опыт специалиста-лаборанта.

Для верификации диагноза важно обеспечить следующее:

  • сбор данных эпидемиологического анамнеза;
  • определение соответствующего материала для исследования, правильно собранного и доставленного вовремя;
  • выбор и применение соответствующего метода идентификации паразита;
  • правильная идентификация паразита;
  • правильная интерпретация результатов исследования.

Cбор материала для гельминтологических исследований включает следующие шаги:

  1. Для исследования собирают фекалии из любой чистой емкости немедленно после дефекации.
  2. Не допускается сбор образцов фекалий из унитаза.
  3. Для детей возможен сбор образца с пеленки, подгузника или горшка.
  4. Используя ложку в крышке контейнера, собрать не менее чем из трех точек стула.
  5. Испражнения для анализов должны доставляться в лабораторию не позднее одних суток после дефекации, а при подозрении на стронгилоидоз – немедленно.
  6. Если по каким-либо причинам доставка в лабораторию затруднена, то необходимо хранить материал при температуре +4–8 °C. Рекомендуется использование консерванта, и тогда исследование можно проводить в течение 3–10 дней после дефекации.

Методы лабораторной диагностики гельминтозов

Методы гельминтологических исследований делятся на прямые и опосредованные (косвенные).

Прямые методы: выявление самих гельминтов, их фрагментов, яиц, личинок в фекалиях, моче, дуоденальном секрете, мокроте и др.

Опосредованные (косвенные) методы: выявление вторичных изменений, возникающих в организме человека в результате жизнедеятельности паразита, путем серологических реакций, общего исследования крови, мочи.

Основным методом лабораторной диагностики глистных инвазий является обнаружение яиц или личинок гельминтов в фекалиях. Наиболее распространенными методами исследования фекалий являются гельминтокопроскопические.

Гельминтокопроскопия – это совокупность методов взятия, обработки и исследования (макро- и микроскопического) проб фекалий человека с целью обнаружения в них яиц, личинок гельминтов, их фрагментов. Она включает следующие виды исследований:

  • копроовоскопия (исследование фекалий на яйца гельминтов);
  • копроларвоскопия (исследование фекалий на личинки гельминтов);
  • макроскопия фекалий (обнаружение фрагментов или зрелых гельминтов в фекалиях).

Микроскопические методы подразделяются на простые, сложные и специальные.

К простым относятся метод нативного мазка и метод толстого мазка под целлофаном по Като – Кац.

Сложные методы, или методы обогащения, основаны на феномене разных удельных весов яиц гельминтов и применяемых реагентов. При обработке фекалий этими растворами происходит концентрация яиц на поверхности раствора или в осадке, в результате чего увеличивается эффективность поиска.

Различают следующие методы обогащения:

  • флотационные (когда используют солевые растворы, удельный вес которых выше удельного веса яиц гельминтов, в результате чего они всплывают в поверхностную пленку, которую и исследуют);
  • седиментационные (когда используют растворы, удельный вес которых меньше удельного веса яиц гельминтов, в результате чего они оседают, образуя осадок).

Методом седиментации возможно определить следующие гельминтозы: описторхоз, клонорхоз, фасциолез, дикроцелиоз, метагонимоз, нанофиетоз, дифиллоботриоз, гименолепидоз, аскаридоз, трихоцефалез, анкилостомидозы, стронгилоидоз, трихостронгилез, некатороз, шистосомоз, кишечные протозоозы (лямблиоз,криптоспоридиоз, изоспороз)

Специальные методы чаще всего необходимы для обнаружения личинок гельминтов. Группа специальных методов направлена на диагностику конкретного геогельминтоза, применяемый метод специфичен только для данного гельминта.

Модификация эфир-формалинового метода седиментации
одноразовыми системами для проведения копрологического исследования

С развитием паразитологии в лечебную практику стали применяться одноразовые системы для копрологического исследования, предназначенные для эффективного концентрирования яиц и личинок гельминтов модифицированным эфир-формалиновым методом.

Системы для копрологического исследования являются одноразовыми и состоят из нескольких элементов:

  • пробирка для образца, в которую имеется готовая смесь для фиксации образца фекалий и последующей седиментации
  • пробирка с системой фильтров и шпателем для забора образца;
  • коническая емкость для сбора отфильтрованного материала.

Система фильтров способствует оседанию грубых частиц непереваренной пищи и клетчатки в смесительной камере, а жидкая часть с выделившимися в нее паразитами, яйцами паразитов под давлением фильтруется и центрифугируется в конической пробирке.

После получения взвеси систему помещают в центрифугу и центрифугируют при скорости 2500–3000 об/мин в течение 1–3 минут, при скорости 1500 об/мин – 5 минут. В конической части пробирки остается жидкая часть пробы с выделившимися в нее яйцами гельминтов, цистами простейших.

Отсоединяют модуль с фильтром и утилизируют после обеззараживания. Коническая часть пробирки остается для микроскопирования. Для этого из нижней части пробирки с помощью пипетки переносят на предметное стекло 2 капли пробы осадка.

Микроскопируют при увеличении: окуляр x10, объективы x10, x40.


Преимущества использования одноразовых систем для копрологических исследований:

  • повышает выявляемость возбудителей;
  • уменьшает расход реагентов;
  • снижает опасность контаминации, исключая контакт персонала с исследуемыми образцами;
  • улучшает стандартизацию метода, повышает достоверность анализа;
  • исключает подготовку и повторную обработку посуды, а также сокращает количество отходов в процессе проведения исследования

Paraclin® S (Параклин С) Реагенты in vitro для проведения копрологических исследований

Список литературы:

ВложениеРазмер
NEW Листовка Paraclin S.pdf7 МБ

Источник: http://cormay.ru/article/diagnostika-parazitarnykh-boleznei

Гельминтозы методы лаб диагностика

Лабораторная диагностика гельминтозов

Методылабораторной диагностики гельминтозов

Копрологическиеисследования (исследования кала) вдиагностике гельминтозов имеют большоезначение, так как многие гельминтыпаразитируют в кишечнике или органахс ним связанных, а яйца их выделяются сиспражнениями.

Испражненияисследуются двумя методами:

1. Макроскопический– обнаруживают гельминтов, их головки,членики, обрывки стробилы. Небольшиепорции кала, перемешивают с водой вплоской ванночке или чашке Петри ипросматривают при хорошем освещениина темном фоне, при необходимостипользуясь лупой. Все подозрительныеобразования пинцетом переносят в другуючашку с водой или на предметное стеклов каплю разведенного глицерина.

При методе отстаивания исследуемую порцию фекалий размешиваютс водой в стеклянном цилиндре, послеотстаивания сливают верхний слой воды.Так повторяют несколько раз. Когдажидкость станет прозрачной, ее сливают,а осадок просматривают в чашке Петри.

2. Микроскопический– для обнаружения яиц и личинокгельминтов. Существует много методовисследования.

Нативныймазок– наиболее распространенный и техническидоступный метод исследования. Можнообнаружить яйца и личинки всех гельминтов.Однако, при небольшом количестве яицих не всегда удается найти. Поэтомуиспользуется метод обогащения.

1. МетодФюллеборга– это метод обогащения, основан навсплытии яиц гельминтозов в насыщенномрастворе NaCl (1,2 – плотность; 400 г NaClна 1 литр воды; 40% раствор NaCl).Метод более эффективен, чем нативныймазок.

В стеклянные банки помещают 2-5 гфекалий и заливают раствором NaCl,размешивают и через 45 минут снимаютобразовавшуюся пленку металлическойпетлей, помещают каплю глицерина напредметное стекло. Исследуют подмикроскопом.

Недостаток метода –замедленное высплывание яиц различныхгельминтов, карликовый цепень –через15-20 минут, аскарид – 1,5 часа,власоглав – 2-3 часа.

2. МетодКалантарян– также метод обогащения, но применяетсянасыщенный раствор NaNO3(1,38 плотность). Большинство яиц всплывает,не требуется исследования осадка.Недостаток – длительное выдерживаниеяиц в растворе, приводит к тому, чтонекоторые яйца начинают набухать иоседать на дно, исчезая с поверхностнойпленки.

3. МетодГорячева– основан на принципе осаждения яиц,обнаружения мелких яиц трематод. Вкачестве раствора используют насыщенныйраствор NaClи сверху осторожно наслаивают 3-4 млраствора фекалий. Через 15-20 часов яйцатрематод оседают на дно. Жидкостьсливают, осадок на предметное стекло ипод микроскоп.

4. Методзакручивания по Шульману– дляобнаружения в кале личинок гельминтов.Исследуют только свежевыделенныефекалии. 2-3 г помещают в стеклянную банкуи приливают 5-кратное количество воды,быстро размешивают палочкой, не касаясьстенок банки – 20-30 минут, затем палочкубыстро вынимают, и каплю жидкости наконце переносят на предметное стеклои микроскопируют.

5. Метод Бермана– основан на способности, личинокгельминтов мигрировать, по направлениюк теплу, и служит для выявления их вфекалиях.

6. Метод Харадаи Мори(методвыращивания личинок) и рекомендуетсядля исследования на анкилостомитозы.Метод основан на том, что в тепле и навлажной фильтрованной бумаге из яицанкилостомид развиваются филяриевидныеличинки, которые легко можно обнаружить.

На середину полоски фильтрованнойбумаги наносят 15 г кала, бумагу с фекалиямипомещают в банку, так, чтобы нижний конецбыл погружен в воду, а верхний закрепленпробкой. Банку выдерживают в термостате280Св течение 5-6 дней. Филяриевидные личинкиразвиваются за это время и спускаютсяв воду. Жидкость исследуют под лупой.

Если трудно обнаружить, жидкостьцентрифугируют, убив предварительноличинок нагреванием до 600.Лаборант должен работать в перчатках.

7. Методы наэнтеробиоз– выявление яиц острицы и бычьего цепня.

а) соскоб сперианальных складок– ватным тампоном, туго намотанным надеревянную палочку и смоченную 50%раствором глицерина. В лабораториитампон смывают 1-2 каплями 50% воднымраствором глицерина.

б) метод липкойлепты (метод Грэхэма)

Липкую лентуприкладывают к перианальным складкам,затем липким слоем к предметному стеклуи микроскопируют.

в) соскоб спомощью глазных палочек (метод Рабиновича).Для перианального соскоба используютстеклянные глазные палочки, широкаячасть которых покрывается специальнымклеем, что позволяет удерживать яйцаостриц.

Исследованиекрови, желчи, мокроты и мышц

  1. Микроскопия крови – обнаруживают личинки филярий.

  2. Исследование дуоденального содержимого и желчи. Яйца и личинки гельминтов паразитирующих в печени, желчном пузыре, поджелудочной железе (описторхоз, фасциолез, дикроцелилз) и двенадцатиперстной кишке (стронгилоидоз).

  3. Исследование мокроты – яйца параганима, личинки аскариды, некатора, стронгилоида, элементы эхинококкового пузыря.

  4. Исследование мышц – при подозрении на трихинеллез исследуют мышцы больного или трупа, а также мясо, предположительно послужившего причиной заражения человека. С целью трихинеллоскопии мышцу разрезают на мелкие кусочки и помещают в компрессорий, это два широких, толстых стекла, которые раздавливают мышцы и личинки трихинеллы обнаруживаются в виде капсул – метод компрессии.

Метод переваривания– мышцы заливают искусственным желудочнымсоком (раствор соляной кислоты и пепсин).Мышцы перевариваются, а личинки легко выявляются. Определение интенсивностиинвазии: количество личинок до 200 на 1 г мышечной ткани – умеренная интенсивностьинвазии; до 500 – интенсивная; свыше 500 –сверхинтенсивная инвазия.

Серологическиеметоды

Серологическиеметоды исследования (выявление антителв сыворотке крови) используются длядиагностики трихинеллеза, эхинококкоза,альвеококкоза, цистицеркоза и рядадругих гельминтов.

Эти методы особоценны, когда наличие паразита в организмедругими более доступными путями доказатьне удается.

Следует учитывать, чтосерологические реакции не являютсяабсолютным показателем наличия илиотсутствия паразита, что обусловленои состоянием иммунитета и спецификойтой или иной реакции.

Источник: https://studfile.net/preview/2362154/

Лабораторная диагностика гельминтозов и паразитозов

Лабораторная диагностика гельминтозов

[40-169] Лабораторная диагностика гельминтозов и паразитозов

6190 руб.

Комплексное лабораторное обследование для выявления основных гельминтозов и протозойных инфекций человека, включающее общеклинические и специфические тесты.

Синонимы русские

Анализы для диагностики гельминтозов и протозойных инфекций.

Синонимы английские

Laboratory diagnosis of protozoal and helminthic infections; CBC, Stool Ova and Parasites test, Cellulose tape test, Protozoal and Helminthic Serology.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь, кал, отпечаток с перианальной области.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
  • Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
  • Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
  • Не принимать пищу в течение 8 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
  • Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить (по согласованию с врачом) прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.), и препаратов, влияющих на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.
  • Полностью исключить (по согласованию с врачом) прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием.
  • Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
  • Не курить в течение 30 минут до исследования.
  • Сбор биоматериала на исследование проводится только утром (до 10:00), до дефекации. Накануне взятия биоматериала не проводить туалет кожных покровов в области ануса и ягодиц.

Общая информация об исследовании

Гельминтозы и протозойные инфекции наблюдаются повсеместно и особенно распространены среди детей и людей, по роду деятельности контактирующих с домашними и дикими животными. Как правило, инфицирование человека является одним из этапов развития гельминтов или простейших.

Многие из паразитов имеют фекально-оральный механизм передачи инфекции и по крайней мере на одном этапе жизненного цикла поражают различные отделы пищеварительного тракта.

Несмотря на то что некоторые гельминтозы и паразитозы человека имеют специфические клинические признаки, в целом дифференцировать эти заболевания на основании клинической картины очень сложно. Основную роль в диагностике этих заболеваний играют лабораторные тесты.

С учетом того, что у одного и того же человека может наблюдаться сочетание нескольких гельминтозов и паразитозов, рекомендуется выполнение сразу нескольких тестов или, что более удобно для врача и пациента, комплексного анализа на распространенные гельминтозы и паразитозы.

Комплексное лабораторное обследование включает общеклинические и специфические анализы на самые распространенные и важные в клиническом плане гельминтозы и протозойные инфекции. Общеклинические тесты: общий анализ крови, лейкоцитарная формула, анализ кала на яйца гельминтов и анализ кала на цисты простейших.

Общий анализ крови и лейкоцитарная формула используются для того, чтобы определить, является ли гельминтоз или паразитоз инвазивным, и также позволяет выявить возможные осложнения, связанные с инфекцией (анемию). Об инвазивности гельминтозов и паразитозов свидетельствует эозинофилия.

 Она характерна для амебиаза, эхинококкоза, описторхоза, токсокароза, трихинеллеза и аскаридоза (в фазу миграции личинок). Эозинофилия не характерна для кишечного аскаридоза, энтеробиоза и лямблиоза. Любая длительно текущая инфекция может приводить к развитию анемии (анемии хронического заболевания).

Гельминтозы и паразитозы, протекающие с изъязвлением слизистой оболочки пищеварительного тракта (например, амебиаз), приводят к развитию железодефицитной анемии.

Анализ кала на яйца гельминтов и анализ кала на цисты простейших включают макроскопическую оценку кала (цвет, консистенция, наличие крови, избытка слизи, макроскопически определяемых паразитов), микроскопию нативного образца кала (наличие цист простейших – трофозоитов, личинок и взрослых особей гельминтов) и микроскопию окрашенного мазка кала (наличие цист и трофозоитов). Анализ кала на яйца гельминтов позволяет выявить большинство кишечных нематод, цестод и трематод. Анализ кала на цисты простейших позволяет выявить Giardia lamblia, Entamoeba histolytica, Balantidium coli и других простейших. Учитывая, что поступление яиц гельминтов или цист простейших в кал может носить непостоянный характер, однократное исследование кала малоинформативно – рекомендуется исследование трех образцов кала. Следует учитывать, что при некоторых гельминтозах (например, описторхоз) появление яиц в кале начинается только через 2-4 недели после возникновения симптомов заболевания. Отрицательный результат исследований не позволяет полностью исключить наличие гельминтоза или паразитоза.

К специфическим тестам для диагностики гельминтозов и паразитозов относятся серологические тесты и анализ на энтеробоз.

Echinococcus, IgG – определение специфических антител IgG к возбудителю эхинококкоза (Echinococcus granulosus или Echinococcus multilocularis). Чувствительность серологических тестов в отношении E. granulosus при поражении печени (самая частая локализация) составляет около 80 %, при поражении других органов (легкие, головной мозг, кости скелета) – несколько ниже.

Opistorchis, IgG – определение специфических антител IgG к возбудителю описторхоза (Opistorchis felineus или Opistorchis viverrini). Из-за невысокой специфичности серологические тесты являются дополнительным способом диагностики описторхоза (главный тест – анализ кала на яйца гельминта).

Toxocara, IgG, титр – количественное определение специфических антител IgG к возбудителю токсокароза (Тохосаra canis).

Серологические тесты обладают достаточно высокой чувствительностью (78 %) и специфичностью (92 %) и могут служить хорошим дополнением или даже альтернативой “золотому стандарту” диагностики данного заболевания – микроскопическому исследованию биопсии ткани, содержащей личинки гельминта (частая локализация – печень и легкие), учитывая, что многие пациенты с токсокарозом – маленькие дети.

Учитывая системный характер таких инфекций, как эхинококкоз, описторхоз и токсокароз, при подозрении на эти заболевания проводят дополнительные обследования, в том числе оценку функции печени.

Trichinella, IgG – определение специфических антител IgG к возбудителю трихинеллеза (Trichinella spiralis и родственные виды). Серологические тесты становятся положительными через 3 недели после инфицирования.

Учитывая, что личинки гельминта поражают мышечную ткань, при данном заболевании также могут быть повышены следующие клинико-лабораторные маркеры: креатинкиназа (КК), лактатдегидрогеназа (ЛДГ) и аспартатаминотрансфераза (АСТ).

Ascaris lumbricoides, IgG – определение специфических антител IgG к возбудителю аскаридоза. Аскаридоз – это самый распространенный гельминтоз человека. Серологические тесты являются дополнительным способом диагностики аскаридоза (главный тест – выявление взрослых особей в области рта и ануса, а также анализ кала на яйца гельминта).

Giardia lamblia, антитела – определение специфических антител к возбудителю лямблиоза. Серологические тесты являются дополнительным способом диагностики лямблиоза (главный тест – анализ кала на цисты паразита). Серологический тест становится отрицательным через 1 год после перенесенной инфекции. Также может быть использован тест на антиген G. lamblia в кале.

Энтеробиоз – распространенный гельминтоз, вызываемый Enterobius vermicularis(острица). Яйца остриц не выделяются с калом, поэтому микроскопическое или любые другие исследования кала не применяются. Лабораторная диагностика энтеробиоза осуществляется с помощью специального метода – микроскопического исследования мазков-отпечатков с кожи перианальной области.

Микроскопическое исследование позволяет произвести дифференциальную диагностику энтеробиоза с аскаридозом, а также другими неинфекционными заболеваниями, сопровождающимися зудом перианальной области (контактным дерматитом, сахарным диабетом).

Учитывая повышенную активность самки в ночные часы, оптимально производить мазок-отпечаток с утра, до совершения утреннего туалета.

Комбинация общеклинических и специфических тестов позволяет достичь наибольшей точности при диагностике гельминтозов и паразитозов.

При эффективном лечении изменения, выявленные в общеклинических тестах, нормализуются, а яйца/личинки/взрослые особи гельминтов или цисты простейших перестают определяться, но серологические тесты могут оставаться положительными в течение некоторого времени даже при эффективном лечении.

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики кишечных гельминтозов и протозойных инфекций.

Когда назначается исследование?

  • При обследовании детей и людей из группы риска заражения гельминтами и простейшими (ветеринары, фермеры, работники, занятые в санитарно-гигиентической сфере);
  • при наличии признаков глистной инвазии или протозойной инфекции: хронической диареи, мальабсорбции, тошноты, потери веса, а также признаков реакции гиперчувствительности (крапивницы и других сыпей);
  • при оформлении ребенка в детский сад, лагерь, бассейн, при госпитализации.

Что означают результаты?

Референсные значения

Для каждого показателя, входящего в состав комплекса:

В норме яйца, личинки и взрослые особи гельминтов, цисты и вегетативные формы простейших в кале отсутствуют. Их обнаружение свидетельствует о текущей инфекции.

Серологические тесты могут оставаться положительными в течение некоторого времени даже при эффективном лечении.

Что может влиять на результат?

  • Время, прошедшее с момента заражения: яйца гельминтов и цисты простейших могут быть обнаружены через 2-4 недели и позже после заражения.
  • Характер и скорость образования яиц гельминтов и цист простейших: часто наблюдается прерывистый характер их поступления в кал, что может привести к получению ложноотрицательного результата и обуславливает необходимость исследования трех, а не одного образца кала.

Важные замечания

  • Для получения точного результата необходимо следовать рекомендациям по подготовке к тесту;
  • результат комплексного анализа следует интерпретировать с учетом анамнестических, клинических и инструментальных данных;
  • отрицательный результат исследований не позволяет полностью исключить наличие гельминтоза или паразитоза.

Также рекомендуется

[06-022] Креатинкиназа общая [06-025] Лактатдегидрогеназа (ЛДГ) общая [06-010] Аспартатаминотрансфераза (АСТ) [06-003] Аланинаминотрансфераза (АЛТ)

Кто назначает исследование?

Врач общей  практики, педиатр, инфекционист.

Литература

  • Kucik CJ, Martin GL, Sortor BV. Common intestinal parasites. Am Fam Physician. 2004 Mar 1;69(5):1161-8.
  • McPhee S.J., Papadakis M. CURRENT Medical Diagnosis and Treatment / S. J. McPhee, M. Papadakis; 49 ed. – McGraw-Hill Medical, 2009.

Источник: https://helix.ru/kb/item/40-169

Твой Терапевт
Добавить комментарий